Agela Venusil AA HPLC法測定"皮革奶"中羥脯氨酸
日期：2011-02-18 有1232人瀏覽
方法摘要：
Venusil AA 氨基酸分析的原理為目前廣泛使用的PITC（異硫氰酸苯酯）衍生法。經過簡化后的衍生方法有很多優點：方便、快速；衍生物單一、穩定，－20℃可貯存數月；采用Venusil AA 柱分析時間短；結果準確；試劑、副產物、溶劑等多種干擾因素可通過快速萃取去除；紫外檢測（254nm）靈敏度高。
樣品：
取某品牌牛奶0.5g，按照博納艾杰爾氨基酸分析方法包進行水解衍生，并取混合氨基酸標準溶液（準確量取氨基酸標準溶液1.0 mL，置于5mL容量瓶中，加0.1mol/L鹽酸溶液定容至刻度）加內標正亮氨酸，然后進行衍生。（異硫氰酸苯酯為衍生劑）
色譜柱：Agela Venusil AA，4.6×250mm，5µm，100Å（訂貨號：VA952505-K）
流動相：A：稱取15.2g無水醋酸鈉，加水1850mL，溶解后用冰醋酸調pH至6.5，然后加乙腈140mL，混勻，用0.45µm濾膜過濾。
B：80%（V/V）乙腈溶液
Venusil AA 氨基酸分析的原理為目前廣泛使用的PITC（異硫氰酸苯酯）衍生法。經過簡化后的衍生方法有很多優點：方便、快速；衍生物單一、穩定，－20℃可貯存數月；采用Venusil AA 柱分析時間短；結果準確；試劑、副產物、溶劑等多種干擾因素可通過快速萃取去除；紫外檢測（254nm）靈敏度高。
樣品：
取某品牌牛奶0.5g，按照博納艾杰爾氨基酸分析方法包進行水解衍生，并取混合氨基酸標準溶液（準確量取氨基酸標準溶液1.0 mL，置于5mL容量瓶中，加0.1mol/L鹽酸溶液定容至刻度）加內標正亮氨酸，然后進行衍生。（異硫氰酸苯酯為衍生劑）
色譜柱：Agela Venusil AA，4.6×250mm，5µm，100Å（訂貨號：VA952505-K）
流動相：A：稱取15.2g無水醋酸鈉，加水1850mL，溶解后用冰醋酸調pH至6.5，然后加乙腈140mL，混勻，用0.45µm濾膜過濾。
B：80%（V/V）乙腈溶液
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時間 |
流動相A |
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0 |
0 |
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2 |
0 |
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15 |
10 |
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25 |
30 |
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33 |
45 |
|
33.1 |
100 |
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39 |
100 |
|
39.1 |
0 |
|
45 |
0 |
流速：1.0mL/min
進樣體積：10μL
溫度：40℃
波長：254nm
Agela Venusil AA HPLC法測定牛奶中羥脯氨酸混和標準品圖譜 （6.50min為羥脯氨酸）
Agela Venusil AA HPLC法測定牛奶中羥脯氨酸圖譜（6.51min為羥脯氨酸）
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